Između grupe sanitarno-indikativnih mikroorganizama ne postoje jasno definisane granice. Neki mikroorganizmi su indikatori fekalne i oralne kontaminacije. Neki su pokazatelji procesa samopročišćavanja. U tom smislu, sva sveta prirodna mjesta smatraju se pokazateljima biološkog zagađenja.
Grupa A sanitarno-indikativnih mikroorganizama. Uključuje stanovnike crijeva ljudi i životinja. Mikroorganizmi se smatraju indikatorima fekalne kontaminacije. Uključuje koliforme - Escherichia, Enterococcus, Proteus, Salmonella. U grupu A spadaju i klostridije koje redukuju sulfite (Clostridium petfringens, itd.), termofili, bakteriofagi, bakteroidi, Pseudomonas aeruginosa, candida, Akinetobacter i aeromonas.
Grupa B sanitarno-indikativnih mikroorganizama. Uključuje stanovnike gornjih disajnih puteva i nazofarinksa. Mikroorganizmi se smatraju indikatorima oralne kontaminacije. Uključuje viridans, a- i (3-streptokoke, stafilokoke (plazma-koagulirajuće, lycytinase-pozitivne, hemolitičke i rezistentne na antibiotike; u nekim slučajevima se određuje i tip Staphylococcus aureus).
Grupa C sanitarno-indikativnih mikroorganizama. Uključuje saprofitske mikroorganizme koji žive u vanjskom okruženju. Mikroorganizmi se smatraju indikatorima procesa samopročišćavanja. Uključuje proteolitičke bakterije, amonificirajuće bakterije i nitrifikacijske bakterije, neke bakterije koje stvaraju spore, gljive, aktinomicete, celulobakterije, bdellovibrios i modrozelene alge.
Glavne grupe sanitarno-indikativnih mikroorganizama
Glavni sanitarni indikator mikroorganizama uključuju koliformne bakterije, enterokoke, Proteus, salmonelu, Clostridium perfringens, termofilne bakterije i bakteriofage enterobakterija (kolifage).
Coli bakterije
Escherichia coli postavili temelje za cijelu SPM grupu. Koliformi uključuju različite članove porodice Enterobacteriaceae. Ovisno o svrsi i objektu istraživanja, na sanitarno-indikativne koliforme postavljaju se različiti zahtjevi. Uobičajeno se dijele u tri podgrupe i, pod različitim okolnostima, činjenica njihovog prisustva se koristi za bakteriološku karakterizaciju predmeta ili supstrata.
Podgrupa I Escherichia coli uključuje koliforme koje se želi identificirati, ali koje ne bi trebale biti prisutne pri ispitivanju objekata i supstrata koji su po prirodi „čisti“ ili koji su postali čisti kao rezultat njihove obrade (na primjer, termičke). Grupa objekata koji imaju takva svojstva uključuje sljedeće. Voda za piće (arteška, hlorisana česma, bunar) i destilovana voda (uzeta iz destilatora ili cevovoda). Termički obrađeni prehrambeni proizvodi (kotleti, kobasice, riba itd.). Analiziraju se uzorci uzeti iz debljine proizvoda.
Mlijeko(uzimaju se iz pasterizatora pre ulaska u mlečne cevi), supe, umaci, kompoti, glavna jela (iz kotlova). Pranja koja se vrše tokom praćenja efikasnosti dezinfekcionog tretmana u propisanom vremenskom okviru (ne ranije od 45 minuta i najkasnije 1 sat nakon tretmana).
Bakterije ove podgrupe Escherichia coli fermentiraju laktozu i glukozu ili samo glukozu u plin na 37 °C i ne pokazuju aktivnost oksidaze. U ovu podgrupu spadaju Escherichia ha //, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter i drugi predstavnici porodice Enterobacteriaceae. Njihovo prisustvo je dozvoljeno u objektima koji nisu klasifikovani kao „čisti“.
Podgrupa II Escherichia coli uključuje koliforme koji ukazuju na neodređenu fekalnu kontaminaciju. Mikroorganizmi fermentiraju laktozu i glukozu u kiselinu i plin na 43-44,5 °C. U ovu podgrupu spadaju bakterije (E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter itd.), koje zadržavaju sposobnost stvaranja plinova pri povišenim temperaturni uslovi. Slični zahtjevi postavljaju se i za koliforme ako je nemoguće zaštititi supstrat od kontaminacije. U ovom slučaju, trebali bismo se ograničiti na određivanje samo pokazatelja epidemiološke bolesti. Takvi objekti uključuju: vodu iz otvorenih rezervoara, otpadne vode, tlo i sve prehrambene proizvode za koje postoji visok rizik od kontaminacije nakon termičku obradu. U takvim slučajevima se ispituju čvrsti prehrambeni proizvodi (površinski sloj), tečni prehrambeni proizvodi, druga i treća servirana jela i ispiranja sa opreme i posuđa. Usjevi se uzgajaju na 43-44,5 °C. E. coli se razlikuje od drugih bakterija po svojoj sposobnosti da fermentira laktozu i glukozu ili samo glukozu.
Podgrupa III Escherichia coli uključuje koliforme, što ukazuje na svježu fekalnu kontaminaciju. Prepoznatljiva karakteristika bakterije ove grupe - sposobnost razlaganja laktoze u gas na 43-44,5 °C.
Organizmi koji su indikatori fekalne kontaminacije
Upotreba tipičnih enteričnih organizama kao indikatora fekalne kontaminacije (a ne samih patogenih agenasa) je opšte prihvaćen princip za praćenje i procjenu mikrobiološke sigurnosti zaliha vode. U idealnom slučaju, otkrivanje takvih indikatorskih bakterija treba ukazati na moguće prisustvo svih patogenih agenasa povezanih s takvom kontaminacijom. Indikatorski mikroorganizmi moraju se lako izolirati iz vode, identificirati i kvantificirati. U isto vrijeme, trebali bi preživjeti duže i unutra vodena sredina nego patogeni agensi, te bi trebali biti otporniji na dezinfekcijsko djelovanje hlora od patogenih. Gotovo nijedan organizam ne može zadovoljiti sve ove kriterije, iako mnogi od njih ispunjavaju u slučaju koliformnih organizama, posebno E. coli, važnog pokazatelja kontaminacije vode iz izmeta ljudi i životinja. Drugi organizmi koji ispunjavaju neke od ovih zahtjeva, iako ne u istoj mjeri kao koliformni organizmi, također se mogu koristiti kao dodatni indikatori fekalne kontaminacije u nekim slučajevima.
Koliformni organizmi koji se koriste kao indikatori fekalne kontaminacije uključuju obične koliforme, uklj. i E. coli, fekalni streptokoki, klostridije koje nose spore koje redukuju sulfite, posebno Clostridium perfringens. Postoje i druge anaerobne bakterije (na primjer, bifidobakterije) koje se nalaze u velikim količinama u izmetu. Istovremeno, rutinske metode za njihovo otkrivanje su previše složene i dugotrajne. Zbog toga su se stručnjaci iz oblasti vodene bakteriologije opredelili za jednostavne, pristupačne i pouzdane metode za kvantitativnu detekciju indikatorskih koliformnih mikroorganizama, metodom titracije (serijska razblaženja) ili metodom membranskog filtera.
Koliformni organizmi se dugo smatraju korisnim mikrobnim pokazateljima kvaliteta pije vodu, uglavnom zato što ih je lako otkriti i kvantificirati. To su gram-negativni štapići, imaju sposobnost fermentacije laktoze na 35-37 °C (obični koliformi) i na 44-44,5 °C (termotolerantni koliformi) do kiseline i plina, negativni na oksidazu, ne stvaraju spore i uključuju vrste E. coli, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella.
Prema SanPiN-u, u 100 ml vode za piće treba da nema opće koliformne bakterije.
Danas, kada je zdravlje postalo ne samo potreba, već i moderan brend, sve više pažnje posvećujemo pravilnoj ishrani i fizička aktivnost. Ali vrlo često zaboravljamo da je naše blagostanje u velikoj mjeri determinirano bilans vode tijelo. I ovdje je važno ne samo koliko vode pijemo, već i kakvu. Koliformne bakterije su već dugo naši pomoćnici u određivanju kvaliteta vode. Ovaj živi indikator kvaliteta vode za piće lako je otkriti i prebrojati i koristi se u mikrobiološkim analizama. U vodi za piće ne bi trebalo biti bakterija - to je činjenica. Ali malo znamo o koliformnim bakterijama u vodi za piće.
Malo opšteg znanja
Njihova vojska je nebrojena
Bakterijske ćelije imaju oblik kuglica (koka) i štapića (bacili), spirala (spirila) i zakrivljenih (vibrio). Autotrofne bakterije same sintetiziraju organske tvari iz anorganskih (fotosintetika i kemosintetika). Ali oni su manjina. Većina bakterija su heterotrofi, među kojima su saprotrofi (koriste organske tvari otpadnih proizvoda i mrtvih dijelova živih organizama) i simbionti (koriste organske tvari živih organizama ili njihove otpadne proizvode). Ljudski simbionti se zovu enterobakterije, a koliformne bakterije koje nas zanimaju upravo su takve.
Ko je ovo?
Predstavnici rodova Escherichia, Citrobacter, Enterobacter i Klebsiella, koji se koriste u sanitarnoj mikrobiologiji kao markeri za potencijalno opasne mikroorganizme koji ulaze u objekte spoljašnje okruženje. Jednostavno rečeno- to su bakterije grupe coli, odnosno sve što je slično E. coli ( Escherichia coli). To su gram-negativne (čisto mikrobiološka karakteristika u odnosu na sposobnost organizama da boje ili ne u razmazima) štapići koji žive u donjem dijelu crijeva ljudi i mnogih toplokrvnih životinja (stoka i živina). Završavaju u vodi sa fekalnim otpadom i mogu poslužiti kao markeri njenog zagađenja.
Biohemijske karakteristike
Sve koliformne bakterije imaju sposobnost fermentacije laktoze, ali to rade na različitim temperaturama. Postoje dvije grupe bakterija:
- Uobičajene koliformne bakterije. Ugljikohidrati se fermentiraju na temperaturi od 35-37°C.
- Fekalne ili termotolerantne koliformne bakterije. Fermentacija ugljikohidrata se odvija na 44,0-44,5°C.
Ovo razdvajanje je važno prilikom izvođenja mikrobiološke analize. U vodi za piće ne bi trebalo biti uobičajenih koliformnih bakterija. Dozvoljen im je ulazak u sisteme za distribuciju vode za piće, ali ne više od 5% uzoraka uzetih u roku od 12 mjeseci. Osim toga, kada se u vodi otkriju uobičajene koliformne bakterije, obavezan je test na prisustvo termotolerantnih vrsta.
Koliko su opasni?
Među svim predstavnicima koliformnih bakterija, predstavnici 15 vrsta različitih rodova smatraju se oportunističkim. Njihovo stanište su donji dijelovi crijevnog trakta ljudi i životinja. To nije isto što i patogene bakterije. Takvi organizmi su uvijek prisutni u mikroflori probavnog trakta, mnogi od njih pomažu tijelu da apsorbira i sintetizira vitamine, razgrađuje proteine i ugljikohidrate. Mogu postati patogeni (uzrokujući bolesti) kada se promijene uvjeti okoline, što će dovesti do njihove pretjerane reprodukcije. Takvi razlozi mogu biti smanjenje imuniteta, smrt normalne mikroflore nakon uzimanja lijekova, inhibicija zaštitnih svojstava sluznice i još mnogo toga. Ali nije činjenica da će se osoba koja pije vodu, čak i ako sadrži ove mikroorganizme, razboljeti.
Treba li nam ovo?
Prepoznavanje koliformnih bakterija u vodi za piće nije tako jednostavno – ne možete je ni okusiti ni vidjeti. Ali za one koji grade kuću ili žele kupiti omekšivač vode, preporučljivo je da testiraju vodu na njihovo prisustvo. Sljedeća tabela prikazuje standarde za vodu centralno vodosnabdijevanje, ali vrijedi uzeti u obzir da se čak i u običnom hladnjaku mogu naći bakterije.
Jedan od fizičke metode je ultrazvuk.
Odlično rade na uništavanju bakterija, mikroba i virusa u procesima obrade vode i prečišćavanja vode.
Prije sterilizacije. Vazduh se ocenjuje po sadržaju Staphylococcus aureus koji u njega ulazi iz gornjih disajnih puteva i usne duplje. Smatra se indikatorom zagađenosti vazduha kapljicama. Drugi mikrobi koji odražavaju sanitarne probleme određenog objekta su gljivice kvasca i plijesni, Pseudomonas aeruginosa i salmonela.
Opće i termotolerantne koliformne bakterije (u 3 uzorka od 100 ml vode)
Prilikom određivanja kvaliteta vode potrebno je izračunati količinu prisutnih koliformnih bakterija kako bi se utvrdilo da li voda zadovoljava utvrđene standarde. Za brojanje pozitivnih koliformnih testova (pretpostavljenih, potvrdnih i fekalnih) koristi se a (Višestruke fermentacijske epruvete). Prilikom brojanja koristi se metoda statističke obrade rezultata testova koja se vrši serijskim razblaženjem uzorka. Rezultati istraživanja su prikazani u oblik najvjerovatnijeg broja koliformnih bakterija (MPN).Na primjer, NP 10 znači da se na 100 ml vode nalazi 10 koliformnih bakterija.
U većini slučajeva, istraživanje obnavljanja broja bakterija provedeno je na ukupnim i fekalnim koliformnim grupama bakterija. Istovremeno, ostaje otvoreno pitanje koliko je obnavljanje broja koliformnih bakterija opasno po zdravlje, budući da različite vrste bakterija imaju različita patogena svojstva, osim toga, ni opće niti fekalne koliformne grupe bakterija nisu jedine patogene mikrobiološke. faktori koji djeluju u vodenoj sredini.
Svrha ovog rada bila je istražiti fenomen prividnog oporavka ove tri glavne podgrupe koliformnih bakterija u kloriranoj otpadnoj vodi. Izvršen je oporavak bakterija u kloriranim vodama i njihov opstanak u nehloriranim vodama. U slučajevima kada se u dužem vremenskom periodu nakon hlorisanja uništavanje bakterija ne razlikuje značajno od prirodnog, upitna je izvodljivost hlorisanja, posebno ako otpadne vode ljudi ne koriste odmah nakon ispuštanja.
Prikazani podaci pokazuju koliko je statistički značajno povećanje sadržaja koliformnih bakterija. Utvrđeno je da se povećava sadržaj svih podgrupa bakterija, a maksimalni sadržaj se uočava četvrtog ili petog dana (tabela 13.5).
| Rice. 12.3. Šema tipične instalacije za biološki tretman otpadnih voda i ispitivanja koja se moraju izvršiti da bi se utvrdio stepen efikasnosti njenog rada / - određivanje parametara protoka g - grube nečistoće 3 - hvatač peska 4 - primarni taložnik 5 - sediment od primarnog taloženja rezervoari 5 - kompaktor 7 - muljeva voda 8 zbijeni sediment 9 - vakuum filter / O -filtrat - hemikalije za kondicioniranje t - kolač 13 - biološki tretman i sedimentacija 14 - višak aktivnog mulja 5 - hloriranje C - brzina protoka 55 - sadržaj suspendiranih tvari U55 - gubitak pri paljenju suspendovanih čvrstih materija - suvi ostaci kolorti - sadržaj fekalnih koliformnih bakterija |
Efikasnost procesa dezinfekcije utvrđuje se analizom grupe koliformnih bakterija, koje su pokazatelji kvaliteta vode. Osetljivost bakterija na hlorisanje je dobro poznata, dok efekat hlorisanja na protozoe i viruse nije sasvim jasan. Ličinke protozoa i crijevni virusi otporniji su na klor od koliforma i drugih crijevnih bakterija. Međutim, postoji vrlo malo dokaza koji ukazuju na to da su trenutne prakse tretmana vode manjkave. Nije bilo dokumentiranih izbijanja bolesti povezanih s konzumiranjem vode koja sadrži virusne ili protozojske infekcije.
Gotovo sve države sada zahtijevaju testiranje tretirane vode na koliformno tkivo, s tim da broj potrebnih testova ovisi o populaciji kojoj se služi. Brojanje fekalnog koliforma, iako je obično nepotrebno iz regulatorne perspektive, jednostavno je i može pružiti dodatni uvid u situaciju. Ponekad se, u odnosu na konkretnu instalaciju, posebno određuju granične vrijednosti za određene pokazatelje, kao što su koncentracija zaostalog hlora, zamućenost, sadržaj otopljenih čvrstih materija, nitrata i boja. Koncentracija zaostalog hlora u distributivnom sistemu se meri da bi se utvrdilo da li je hlorisanje dovoljno. Ostala laboratorijska ispitivanja odnose se na praćenje hemijskih tretmana, utvrđivanje i otklanjanje određenih problema koji se javljaju u objektima distributivnog sistema, te pritužbe potrošača na kvalitet vode. Hemijski reagensi moraju ispunjavati zahtjeve relevantnih specifikacija i trebaju biti podvrgnuti tradicionalnoj analizi, uz novčanu kaznu dobavljaču ako odstupaju od specifikacija. Na primjer, kreč se obično kupuje sa 88-90% CaO, stipsa sa 17% AI2O3 i aktivni ugljen prema specifikacijama za sadržaj fenola. Ako ugovor o snabdijevanju hemikalijama navodi kazne za dobavljača na osnovu rezultata laboratorijskih ispitivanja, to može spriječiti postrojenje za prečišćavanje vode da primi materijale ispod standarda.
Obnavljanje sadržaja koliformnih bakterija u kloriranim vodama
Inicijal
Koliformne bakterije (koliformne bakterije)
Otkrivanje koliforma u prehrambenim proizvodima ukazuje na njihovu fekalnu kontaminaciju. Koliformi mogu dospjeti u proizvode iz vode, opreme, ruku radnika i drugih izvora. Koliformi se dijele u dvije podgrupe:
- 1) obične koliformne bakterije koje razgrađuju glukozu, laktozu i manitol u kiselinu i gas na 37°C tokom 24 sata;
- 2) termotolerantne koliformne bakterije koje razgrađuju glukozu i laktozu u kiselinu i plin na 43-44,5°C.
Grupa koliforma uključuje porođajEscherichia , Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella , Serratia (Tabela 12.2).
Rod Escherichia. Tipska vrsta ovog roda je Escherichia coli. On igra važnu ulogu u mikrobiocenozi crijeva ljudi i životinja.
E. coli- mali gram-negativni štapići sa zaobljenim krajevima dimenzija (2-3) x (0,5-0,7) mikrona. Ne formiraju spore i nepokretne su. Postoje varijante koje su pokretljive zbog peritrihijalno lociranih flagela, ali nemaju kapsule. Fakultativni anaerobi. Energiju primaju disanjem i fermentacijom. Prilikom fermentacije ugljikohidrata E. coli akumuliraju kiseline - mliječnu, sirćetnu, jantarnu (pozitivna reakcija sa metil crvenim) i plinove - CO 2 i H 2 (test fermentacije). Escherichia dobro raste na jednostavnim hranjivim podlogama. Optimalna temperatura rast je 37°C, optimalna vrijednost pH okoline je 7,0-7,4.
Tabela 12.2
Znakovi porođaja vezani za koliforme
|
Mobilnost |
Fermentacija |
Obrazovanje |
Obrazovanje anetoina |
Podijeliti citrati |
Reakcija sa metil crvenim |
|
|
Escherichia |
||||||
|
Klebsiella |
||||||
|
Enterobacler |
||||||
|
Citrobacter |
||||||
|
Serratia |
Rod Enterobacter. Predstavnici roda se nalaze u svježa voda, tlo, otpadne vode, na bilju, povrću; Izolovani su iz crijeva ljudi i životinja. Vrste roda in poslednjih godina izolovan za akutne gastrointestinalne bolesti, dispepsiju, infekcije žuči i urinarnog trakta, gnojne lezije moždanih ovojnica, sepsu kod ljudi i životinja. Tipičan pogled - E. cloacae.
Ćelije Enterobacter- ravni štapići dimenzija (2-3) x (0,5-0,6) mikrona, peritrihozni, gram-negativni, ne formiraju spore ili kapsule. Optimalna temperatura rasta je 30-37°C. Biohemijske karakteristike vrsta ovog roda: stvaranje acetoina tokom fermentacije ugljenih hidrata (pozitivna Voges-Proskauerova reakcija), razlaganje natrijum citrata u Simmonsovom mediju.
Rod Citrobacter (citrusi- (limun) i bakterija). Predstavnici ovog roda prisutni su u izmetu ljudi i životinja, zemljištu, otpadnim vodama i prehrambenim proizvodima. Pod određenim uslovima mogu izazvati bolesti kao što su gastroenteritis i dispepsija. Sa razvojem gnojno-upalnih procesa, najznačajniji je tip C. freundii, koja je tipska vrsta ovog roda. Citrobacter ćelije su ravne šipke dimenzija (1-6) x (0,5-0,8) mikrona, pojedinačne ili u parovima. Peritrichous. Ne formiraju spore i ciste i ne formiraju kapsule. WITH. freundii proizvodi vodonik sulfid. Na krvnom agaru oko kolonija se formiraju jasne zone hemolize.
Rod Klebsiella nazvan po bakteriologu E. Klebsu. Bakterije ovog roda su izolovane iz vode, tla, prehrambeni proizvodi. Prisutni su u biocenozama nazofarinksa i crijeva. Uzrokuje bolest klebsijelozu kod djece mlađe od 1 godine. Bolest se javlja u obliku dijareje, meningitisa, bronhopneumonije, gnojno-septičke upale. Predstavnici roda: K. pneumonia,
K. mobilis i saprofitske vrste: K. planticola, K. terrigena. To su ravne šipke dimenzija (0,6-6,0) x (0,3-1,0) mikrona, pojedinačne ili u paru. Razlikuju se od ostalih enterobakterija karakteristične karakteristike: imaju klasičnu polisaharidnu kapsulu i nemaju flagele. Tipičan pogled - Klebsiella pneumonia.
Rod Serratia. Ime roda vezuje se za ime italijanskog fizičara Serafina Serratija. Nalaze se u tlu, vodi, na površini biljaka, kao i u probavnom traktu ljudi, insekata i glodara kao komensali. Kod osoba sa oslabljenim imunološkim sistemom, nazubljeni mogu izazvati gnojne upale različitih lokacija. Tipičan pogled - Serratia marcescens. Serratia marcescens - to su ravne male šipke dimenzija (0,5-0,8) x (0,9-2,0) mikrona. Peritrihi su, pod određenim uslovima, sposobni da formiraju kapsulu. Većina kolonija Serratia ofarbano razne nijanse crvene boje zbog stvaranja pigmenta prodigiozina.
Prilikom karakterizacije koliforma uzimaju se u obzir sljedeće diferencijalno dijagnostičke karakteristike:
- 1) inkubacija useva na jednoj temperaturi - 37°C;
- 2) sposobnost fermentacije laktoze - obrazac rasta na Endo mediju (tzv. laktozni test). Kolonije koje se broje su tamnocrvene, sa ili bez metalnog sjaja;
- 3) oksidazni test: kolonije na Endo mediju se ispituju na prisustvo oksidaze. Za dalju identifikaciju ostavljaju se kolonije negativne na oksidazu. Kolonije s pozitivnim oksidaznim testom koje pripadaju gram-negativnim bakterijama iz rodova Pseudomonas, Aeromonas, Vibrio, nisu uzeti u obzir;
- 4) preparati iz karakterističnih kolonija se boje Gram bojom - uzimaju se u obzir gram-negativni štapići;
- 5) test fermentacije na Hiss mediju sa glukozom za otkrivanje sposobnosti bakterija da fermentiraju glukozu sa stvaranjem kiseline i gasa.
Uz koliformne bakterije, uzročnici crijevnih bolesti uzrokovanih konzumacijom kontaminiranih prehrambenih proizvoda mogu biti i bakterije rodova Morganella I Providencia iz porodice Enteribacteriaceae.